广谱胁迫蛋白 (USP ,universal stress protein)蛋白普遍存在于细菌、古细菌、真菌、原生动物及植物中,赋予生物耐盐碱、耐极端温度、耐抗生素、耐营养缺失等功能。而结核分枝杆菌中也存在USP相关蛋白(O’Toole R, Williams HD. Universal stress proteins and Mycobacterium tuberculosis. Res Microbiol, 2003,154(6):387-92.)。

早前,John Chan研究团队发现USP家族Rv2623编码蛋白能调控结核分枝杆菌的生长,在建立结核分枝杆菌抵抗宿主细胞杀伤作用的过程中可能扮演着重要角色,但是具体机制尚不清楚(PLOS Pathogens:Mycobacterium tuberculosis Universal Stress Protein Rv2623 Regulates Bacillary Growth by ATP-Binding: Requirement for Establishing Chronic Persistent Infection)。近期该研究团队对Rv2623进一步深入研究,相关结果发表在PLOS Pathogens(Mycobacterium tuberculosis universal stress protein Rv2623 interacts with the putative ATP binding cassette (ABC) transporter Rv1747 to regulate mycobacterial growth)杂志。文中通过酵母双杂交等实验,发现Rv2623蛋白与Rv1747转运蛋白N端有相互作用;进一步通过生化,免疫化学,质谱等实验研究表明Rv2623蛋白237位苏氨酸磷酸化修饰与Rv1747蛋白相互结合起重要作用;通过构建Rv1747、Rv2623基因敲除及回补菌株,发现Rv2623敲除后,结核分枝杆菌phosphatidyl-myo-inositol mannosides (PIMs)分泌增多,而Rv1747敲除后,PIMs分泌减少;深入研究基因敲除菌株后发现Rv2623与Rv1747相互作用调控结核分枝杆菌的生长主要是通过负调控Rv1747的活性,同时也发现Rv1747蛋白参与PIMs的转运。

上海晶诺生物科技有限公司专注于结核分枝杆菌基因敲除,利用噬菌体介导的同源重组方法构建结核分枝杆菌基因敲除突变体。结核分枝杆菌生长缓慢,导致研究周期加长,严重影响科研人员实验进度,本公司已成功构建结核分枝杆菌中USP相关蛋白(Rv1028,Rv1636,Rv1996,Rv2005c,Rv2026c,Rv2028c,Rv2319c,Rv2623,Rv2624c,Rv3134c)基因敲除用重组噬菌体以及过表达质粒,可随时构建相应基因敲除突变体及过表达菌株,缩短您的研究进度。

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