技术服务

结核分枝杆菌基因敲除技术服务

技术原理与实验步骤

采用噬菌体介导的同源重组进行基因敲除:首先构建同源交换位点(AES),随后将其整合到结核分枝杆菌噬菌体基 因组中,获得噬菌粒(phasmid);将噬菌粒导入耻垢分枝杆菌,获得整合有同源交换位点的重组噬菌体,经体外扩 增获得高滴度的重组噬菌体,对结核分枝杆菌进行转染;将转染后的结核分枝杆菌涂布到含潮霉素抗性的固体培养基 上,37°C培养 4-5 周,挑取单克隆,通过 PCR 等方式进行验证。

服务流程

1.客户提供敲除基因编号;

2.构建同源臂及包装噬菌体;

3.噬菌体感染结核菌并验证阳性克隆;

4.提交结核分枝杆菌基因敲除菌株(液体)及实验相关的引物、测序结果、详细的结题报告。

服务周期4-6个月。