结核纳米抗体定制服务!

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01 什么是纳米抗体?

纳米抗体(Nanobody),即重链单域抗体VHH (variable domain of heavy chain ofheavy-chain antibody) ,它是最小的功能性抗原结合片段。相较于传统抗体,纳米抗体的分子量仅为15 kDa(约1/10),却保留了高亲和力与特异性,成为探索精准医疗、疾病诊断及治疗的关键工具。在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)研究中,纳米抗体因其穿透力强、稳定性高的特点,集传统抗体和小分子药物的优点为一体,在疾病的诊断及治疗方面有广阔的应用前景,为攻克耐药性结核病提供了全新思路。

 

02 纳米抗体的核心特点

(1)分子量小,穿透力强:纳米抗体的体积仅2.5×4 nm,可轻松穿透细胞屏障,直达病灶(如结核肉芽肿),能更好地发挥作用。

(2)高稳定性:纳米抗体内部二硫键的存在,使其耐高温、易储存,在85℃下仍活性完好、抗蛋白酶降解,且耐受高温、强酸、强碱等致变性条件,适用于复杂样本(如结核患者的痰液或组织样本)检测。

(3)高特异性:纳米抗体的CDR3区较长,可形成指状凸环,进一步识别并结合传统抗体难以触及的隐藏抗原表位(如酶活性中心、病毒囊膜裂隙),对同源蛋白家族的交叉反应率<1%,可以有效避免传统抗体因轻链干扰产生的假阳性。

(4)高亲和力:纳米抗体仅由重链可变区(VHH)构成,其互补决定区(CDR3)更长且构象灵活(通常含16-21个氨基酸),能形成更深的抗原结合口袋,增强与抗原表位的互补性。亲和力(KD值)可达0.1~10 nM(传统抗体通常为1~100 nM)。

(5)高亲水性:纳米抗体FR2区含4个特征性亲水残基,CDR区中亲水氨基酸占比高达45%~65%,使其在溶解性、抗聚集性和低吸附性上全面超越传统抗体。

(6)结构简单,易改造:纳米抗体易于进行基因工程改造,可串联多价或多特异性结构,同时结合多个抗原,或偶联药物、荧光标记物,形成融合蛋白进行靶向治疗。

(7)制备简单,易生产:纳米抗体可在细菌、噬菌体、酵母等微生物中高效表达,可大规模生产,降低成本。

(8)低免疫原性:纳米抗体的骨架区(FR)与人类VH区序列同源性大于80%,易于人源化,且纳米抗体不含Fc段尾端,从而避免了Fc段引起的补体反应,对人体的免疫原性弱。

 

03 服务流程

第一步:制备抗原

抗原可由晶诺生物制备或由客户提供*。

第二步:羊驼/骆驼免疫

免疫前预留阴性血清。免疫羊驼/骆驼,一般要免疫 4~5 次。从第二次免疫后开始采外周血,分离血清检测血清效价。分离羊驼/骆驼外周血单个核细胞。

第三步:VHH噬菌体库生成

从羊驼/骆驼血淋巴细胞中提取RNA,反转录为cDNA,再进行VHH扩增,电转化至感受态细胞后建立噬菌体文库,经噬菌体展示技术得到多株阳性克隆。

第四步:淘选和筛选

至少3轮淘选(液相、固相淘选和细胞淘选),用ELISA检测方法鉴定和评估阳性克隆筛选,对阳性克隆进行测序和测序结果分析。

第五步:VHH-Fc抗体生产

采用高效重组表达系统,大量表达纯化可溶性纳米抗体,采用相应检测方法评估所得纳米抗体的抗原结合特异性、稳定性等各方面性能。

*特色服务

晶诺生物拥有结核分枝杆菌重组抗原蛋白库,现有蛋白抗原50种以上,并支持结核抗原定制服务,特有的耻垢分枝杆菌表达系统M.smegmatis mcc155Δmsmeg1583更能还原结核分枝杆菌目的蛋白表达、合成以及修饰状态,已利用该菌株成功表达纯化EchA6(Rv0905)、Rv3875等在大肠杆菌表达系统难以表达的蛋白。

分枝杆菌蛋白翻译后修饰及耻垢分枝杆菌表达系统的构建

 

04 晶诺纳米抗体产品

货号产品名称规格
GRVP1636Rv1636 纳米抗体对100ug/500ug
GRVP1804Rv1804c 纳米抗体对100ug/500ug
GRVP1980Rv1980c 纳米抗体对100ug/500ug
GRVP2873Rv2873 纳米抗体对100ug/500ug
GRVP2875Rv2875 纳米抗体对100ug/500ug
GRVP3804Rv3804c 纳米抗体对100ug/500ug
GRVP3875Rv3875 纳米抗体对100ug/500ug
GRVN1636Rv1636 纳米抗体100ug/500ug
GRVN1804Rv1804c 纳米抗体100ug/500ug
GRVN1980Rv1980c 纳米抗体100ug/500ug
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GRVN2875Rv2875 纳米抗体100ug/500ug
GRVN3804Rv3804c 纳米抗体100ug/500ug
GRVN3875Rv3875 纳米抗体100ug/500ug

 

05 晶诺纳米抗体亲和力案例分享

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