蛋白质翻译后修饰（PTM）
蛋白质翻译后修饰（PTM）是调节蛋白质生物学功能的关键步骤之一，是蛋白质动态反应和相互作用的一个重要分子基础，同时，它也是细胞信号网络调控的重要靶点。随着基于质谱的蛋白质组学技术的发展与成熟，研究发现在原核生物中也存在大量类似于真核生物的复杂多样的PTM产物。
作为一种增加蛋白质组复杂度的手段，PTM主要是通过功能基团或蛋白质的共价添加、调节亚基的蛋白水解切割或整个蛋白质的降解等方式增加蛋白质组的功能多样性。经修饰的蛋白呈现结构、活性以及稳定性的改变，从而影响蛋白质的空间构象、亚细胞定位以及与其它细胞分子的相互作用。
迄今，多达上百种蛋白质翻译后修饰被发现。近年来，结核分枝杆菌中的PTM现象也被大量发现并研究（见表1），包括：PTM现象在结核分枝杆菌的毒力变化以及感染免疫中的作用；PTM直接（作为免疫原表位的结构基团）或间接（介入真核生物固有免疫受体信号通路或抗原处理加工途径等）调节结核分枝杆菌的免疫蛋白质组；有无PTM的结核分枝杆菌T细胞抗原表位库的无偏检测与鉴定技术等等。
表1 结核分枝杆菌蛋白质组翻译后修饰类型
耻垢分枝杆菌表达系统
目前，大多数研究采用大肠杆菌表达分枝杆菌蛋白，但结果表明，在该宿主中的分枝杆菌蛋白表达情况不理想。考虑到物种之间的遗传背景差异性，真实还原结核分枝杆菌的目的蛋白表达、合成以及修饰状态，构建结核分枝杆菌的目的蛋白表达菌株是重要的研究基础。由于结核分枝杆菌的目的蛋白表达纯化难度大，因此常用其同源菌株耻垢分枝杆菌作为蛋白表达宿主。耻垢分枝杆菌相较于结核分枝杆菌具有安全性较高及生长速度快等特点，因此对野生型耻垢分枝杆菌的遗传改造有益于表达结核分枝杆菌蛋白。
由于C端含有多个连续组氨酸（His）的耻垢分枝杆菌GroL2蛋白的表达使得带有His标签的分枝杆菌蛋白纯化变得非常困难（见图1），通过遗传工程手段敲除该基因可以有效地解决这一问题。
晶诺生物现已通过噬菌体介导的同源重组法将耻垢分枝杆菌的msmeg1583（GroL2）基因敲除，获得M. smegmatis mcc155 Δmsmeg1583菌株，并利用该菌株成功表达纯化EGFP、EchA6（Rv0905）蛋白（见图2，表2）。
图 1 野生型耻垢分枝杆菌表达蛋白纯化图
图 2 M. smegmatis mcc155 Δmsmeg1583表达蛋白纯化图
表 2 纯化后EchA6（Rv0905）蛋白质谱鉴定
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名称：MS-G01感受态细胞
规格：200 μL/管*10管
货号：GOMY8001
说明：由Mycobacterium smegmatis mcc155Δmsmeg_1583 ::(sacB hygB)制备而成的电转感受态细胞，潮霉素抗性（Hyg+）。可以搭配His-tag质粒用于表达、纯化相关蛋白。
培养方法：在7H10固体培养基（含有电转质粒相应的抗生素）上培养3-5天可见单克隆。
存贮方式：-80℃保存3-6个月
注意事项：
1.加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10；
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险；
3. 避免感受态细胞反复冻融；
4. 避免用移液枪吹吸；
5. 操作过程注意低温；
6. 整个操作过程要轻柔。
货期：1周
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晶诺生物也提供其他分枝杆菌的感受态产品，欢迎咨询订购。
| 货号 | 名称 | 规格 |
| GOMY0006 | 耻垢感受态细胞 | 200ul/管*10管 |
| GOMY0007 | BCG感受态细胞 | 200ul/管*10管 |
| GOMY0008 | H37Ra感受态细胞 | 200ul/管*10管 |
| GOMY0142 | 海分枝感受态细胞 | 200ul/管*10管 |
| GOMY0143 | 脓肿感受态细胞 | 200ul/管*10管 |
