Product Description
产品名称
耻垢感受态细胞（耻垢分枝杆菌电转感受态细胞，Mycobacterium smegmatis mc2155 Electroporation Competent Cell）
规格
200 μL/管*10管
货号
GOMY0006
产品说明
耻垢分枝杆菌电转感受态细胞，用于电转质粒至耻垢分枝杆菌、噬菌体构建等。
特点
在7H10固体培养基（含有电转质粒相应的抗生素）上培养3-5天可见单克隆。
运输方式
干冰运输
存贮方式
-80℃保存3-6个月
操作方法
1. 取-80℃保存的电转感受态细胞插入冰中5 分钟，待其融化。
2. 将适量DNA加入300 µL的电转感受态细胞中并轻轻混匀，避免产生气泡，然后立即插入冰中，冰上孵育10min。
3. 然后转入2 mm电转杯中，擦净电转杯外壁上的水，然后电击，电击参数：电压2.5 kV, 电阻1000 Ω，电容25 µF。
4. 电击完后，立即加入1 mL室温 7H9液体培养基，37°C培养箱孵育过夜。
5. 5000 rpm离心10 min，去掉大部分上清，剩余100-200 µL重悬菌体涂平板，使用7H10固体培养基(含有电转质粒相应的抗生素)。
6. 37℃培养箱培养3-5天，然后挑取克隆验证。
注意事项
1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10；
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险；
3. 避免感受态细胞反复冻融；
4. 避免用移液枪吹吸；
5. 操作过程注意低温；
6. 整个操作过程要轻柔。
